ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE

 

手順

  1. ゲル板を100%エタノールとキムワイプを使ってキレイに磨く(汚れがないように)。
  2. コームとシールガスケットもキレイに磨く。
  3. ゲル板を組み立ててクリップで留める。
  4. 1xTBE 1.5 mL, 30%アクリルアミド 2.5 ml10% APS 100 μl,DW 10.9 ml(ワイドゲル2枚分)を入れる。 

     最後にTEMED15μl加え、ゲル板に流し込み、コウムをさして固まるまで放置する。

 

 

2

4

6

8

10

DW

10.9ml

21.8ml

31.7ml

41.6ml

52.5ml

1xTBE

1.5ml

3ml

4.5ml

6ml

7.5ml

30% A.A

2.5ml

5ml

7.5ml

10ml

12.5ml

10% APS

100ul

200ul

300ul

400ul

500ul

TEMED

15ul

30ul

45ul

60ul

75ul

 

試薬組成

10xTBE      108 g Tris, 55 g Boric acid, 4 ml 0.5 M EDTA(pH 8.0) / 1000 ml 

1xTBE       100 ml 10xTBE /MQ1000 mlにする。

30% アクリルアミド溶液 29 g acrylamide, 1 g bis-acrylamide /MQ100 mlにする。

10 APS    2 g APS / MQ20 mlにする。

NNNN-TEMED