イネ培養細胞

実験に使う細胞を作る場合は1週間に1回、継代だけが目的であれば2-3週間に1回継代を行う。

培養にはAA培地を用いる

AA培地の作り方

(1)約800mlの蒸留水にスターラーで撹拌しながら、以下の試薬を加えて溶かす。

添加物 添加量 単位

sucrose 30 g

(2)以下の濃縮保存液を加える。

濃縮保存液成分 濃縮保存液成分量 濃縮保存液成分単位

MS_micro1(x100) 10 ml

MS_micro2(x100) 10 ml

AA_No1(x10) 100 ml

AA_No4(x100) 10 ml

AA_No5(x10) 100 ml

0.2mg/ml 2,4-D 5 ml

0.2mg/ml kinetin 1 ml

(3)約950mlになるように蒸留水を加える。

(4)1N KOHを用いてpHを5.8に調整する。

(5)蒸留水を加えて1リットルとする。

濃縮保存液

MS_micro1(x100)　　(1000mL)

　H3BO3 620 mg

　MnSO4・4H2O 2,230 mg

　ZnSO4・7H2O 860 mg

　Na2MoO4・2H2O 25 mg

　CuSO4・5H2O 2.5 mg

　CoCl2・6H2O 2.5 mg

　KI 83 mg

MS_micro2(x100)　　(1000mL)

加熱してキレートさせる

　Na2-EDTA 3,730 mg

　FeSO4・7H2O 2,780 mg

AA_No1(x10)　　(500mL)

　　CaCl2・2H2O 2.2 g

　MgSO4・7H2O 1.85 g

　KH2PO4 0.85 g

　KCl 14.7 g

AA_No4(x100)　　(100mL)　-20℃で保存

myo-inositol 1,000 mg

nicotinic acid 5 mg

pyridoxine・HCl 5 mg

thiamine・HCl 1 mg

AA_No5(x10)　　(500mL)　-20℃で凍結保存

glycine 0.375 g

L-glutamine 4.385 g

L-aspartic acid 1.33 g

L-arginine 1.14 g

0.2mg/ml 2,4-D　　(100mL)

　2,4-D 20 mg

0.2mg/ml kinetin　　(100mL)

　kinetin 20 mg

培養細胞の分譲先からの情報

＜RPC00020＞　　理研BRC管理番号

細胞名 OS-1

植物和名 イネ

植物英名 rice, paddy rice

種名 Oryza sativa L.

特徴 -

培地番号 15　

培養方法 寒天培養 1.2%

継代方法 28日毎に新鮮な培地に移植　（100ml 三角フラスコ）

培養温度 27℃ 〜　27℃

光条件 暗所

参考文献 Bull. Natl. Inst. Agrobiol. Resour.(1993) 8:1-10

分譲制限 a

寄託者 駒嶺穆

樹立者 大橋祐子